細菌鑒定
北京睿博興科生物技術有限公司
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BSP甲基化測序


簡介

DNA甲基化是最早發現的修飾途徑之一,真核生物中甲基化僅發生于胞嘧啶(C)。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩定性及DNA與蛋白質相互作用方式的改變,從而控制基因的表達。甲基化會使胞嘧啶轉化為5’-甲基胞嘧啶,CpG位點在基因組是不常見的,主要密集于接近基因啟動子的位置,統稱為CpG島。CpG位點的甲基化可以對基因表現有重要的影響。

目前本公司主要提供BSP甲基化測序檢測技術服務。該技術原理如下:

用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,未發生甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變。隨后設計在CpG島兩端設計引物進行PCR,在擴增過程中尿嘧啶全部轉化為胸腺嘧啶,將目的產物純化后進行TA克隆,每個克隆挑取陽性克隆測序,最后將測得的序列與原始序列比對,統計甲基化位點及數量,并分析甲基化程度。


1. 技術流程




2. 結果示例


3. 可提供的服務

(1) 基因組DNA提取

(2) 查找CpG島

(3) 引物的設計與合成

(4) 基因組亞硫酸鹽處理

(5) BSP-PCR擴增

(6) TA克隆

(7) 一代測序


4. 送樣要求

組織:500mg以上,需低溫運輸

血液(抗凝血):>1ml,需低溫運輸

細胞:大于106,收集細胞沉淀,需干冰運輸

基因組DNA樣品要求OD260/OD280=1.8~2.0,濃度大于100ng/ul,總量大于2ug,瓊脂糖電泳條帶清晰無降解。


5. 公司提供的結果

一代測序結果

BSP甲基化測序項目服務單下載

6.聯系我們

技術支持電話: 180 0102 7002 (微信同號)

E-mailsupport@ruibiotech.com

地址:北京市大興區亦莊經濟開發區地盛東路1號愛普益大廈2401

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