TA克隆

簡介

TA克隆是把PCR片段與一個具有3’-T突出的載體DNA連接起來的方法。通過PCR的方法擴增目的基因片段的過程中，由于往往不清楚目的基因的DNA序列，獲得的目的片段通常需要通過TA克隆的方法，重組到T-載體中，通過序列測定清楚DNA序列。由于在PCR過程中，使用的DNA聚合酶不同，往往分為2種情況：

使用不同的Taq酶，在PCR擴增循環結束后，加上72℃ 10分鐘一個過程，Taq酶可以在擴增產物的   3末端加上A，因此PCR產物回收純化后可以和T載體直接連接。

使用高保真的DNA聚合酶，如pfu酶，由于其不能在擴增產物的3末端加上A，因此，需要在回收純化后進行加A的過程，通常是以PCR回收產物為模板，加上一定量的普通Taq酶和反應液，加入dATP（或dNTP）， 72℃ 10分鐘，然后將加A產物直接用于TA連接。

本公司采用的載體既適用于Taq系列DNA聚合酶擴增的末端加“A”片段的克隆，也適用于pfu、KOD等高保真聚合酶擴增的平末端片段的克隆，方便高效。

1. 技術流程

2. 結果展示

黃色區域為T載序列，白色區域為目的PCR產物序列。

3. 可提供的服務

(1) PCR擴增（包括PCR產物的純化）

(2) TA克隆

(3) 一代測序

4. 送樣要求

(1) 基因組DNA：濃度20-30ng/ul以上，OD260/280在1.7-2.1左右，電泳有基因組主帶。需冰袋運輸

(2) 已純化PCR產物：濃度＞50ng/μl，總體積＞20μl。需冰袋運輸

(3) 未純化PCR產物：濃度＞50ng/μl，總體積＞30μl。需冰袋運輸

5. 公司提供的結果

(1) 一代測序結果（可提供去除載體序列服務）

(2) 電泳膠圖

TA克隆項目電子訂單

6. 聯系我們

技術支持電話： 180 0102 7002 （微信同號）

E-mail：support@ruibiotech.com

地址：北京市大興區亦莊經濟開發區地盛東路1號愛普益大廈2幢401