基因合成FAQ

Q1：與傳統PCR克隆相比，基因合成有什么優點？

A1：基因合成有如下優點：

· 密碼子優化技術提高了蛋白的表達量及可溶性；

· 基因合成獲得的基因無突變、準確，普通PCR產生非預期結果的可能性大，從而影響后續實驗的進行；

· 不需要依賴模板以及酶切位點。

Q2：睿博興科基因合成服務的優勢有哪些？

A2：睿博興科基因合成服務主要競爭優勢：

· 可以合成任何基因，包括含重復序列、高GC含量、發夾結構、連續單一堿基重復等富含特殊結構的復雜基因；

· 密碼子優化技術：提高了蛋白表達量及可溶性，促進蛋白正確折疊；

· 為客戶提供具有競爭力的價格，幫助客戶減少預算支出；

· 基因合成周期短；

· 特有的安全制度保證客戶的信息安全，公司嚴格按照與客戶簽定的基因合成服務協議和保密合同執行服務；

· 服務質量可靠，提供DNA測序結果，保證所合成的基因序列100%準確

Q3：睿博興科能合成多長的基因？

A3：睿博可為您合成小于5kb的基因序列，>60%高GC含量或<40%低GC含量的基因；重復片段基因。

Q4：密碼子優化有必要嗎？

A4：對于用于蛋白表達的基因來說，多數情況下是有必要的。如真核生物的基因需要在原核生物中表達。由于真核生物的密碼子偏好和原核生物有很大不同，對基因進行密碼子優化將顯著提高表達效率。

Q5：如需密碼子優化，我需要提供哪些信息？

A5：若需密碼子優化，我們需要您提供如下信息：a.被優化的基因序列或者蛋白序列；b.優化的宿主；c.基因兩端需添加的酶切位點或者基因內部需去除的酶切位點；d.是否需要特定的終止密碼子；

Q6：睿博興科可以將合成的基因克隆至我指定的載體嗎？

A6：可以。除pUC57和topo，公司還有多個常用商業化載體，具體可發郵件進行咨詢?？蛻糇詡涞妮d體，需要您提供載體相關信息，我們會根據目的基因的長度收取相應的亞克隆費用。

Q7：基因合成服務提供的數據報告包含哪些文件，每個文件需要使用什么軟件打開？

A7：您所收到的基因合成服務數據報告是壓縮文件，可以使用Winrar（4.0以上版本）打開，數據報告共含有4 類文件，分別為：

· Seq格式文件——根據您提供訂單序列生成的目標序列文件，可以使用DNASTAR 軟件打開；

· abi或ab1格式文件——測序彩圖，可以使用Chromas 軟件打開；

· gbk格式文件--合成后的全質粒序列，用snapgene打開

· word 格式文件——基因合成結果報告及QC文件。

Q8：如何使用睿博興科基因合成交付的質粒及穿刺菌？

A8：質粒使用方法：

· 所提供的質粒進行了真空冷凍干燥，干燥后的質粒呈薄膜狀或粉末狀附在離心管底部，使用前請先離心再小心開啟，以免丟失；

· 標簽上已注明質粒抽提的方式和質粒的量，對于正常訂單，通常使用質粒小抽方法進行抽提，通過紫外分光光度計在260nm波長下進行定量。所供質粒保證OD₂₆₀/OD₂₈₀在1.80～2.0之間，滿足一般的分子生物學實驗要求，如PCR 擴增、酶切、轉化和測序等；

· 提供2-4μg凍干質粒DNA，建議用40μL滅菌后的雙蒸水或10mM pH8.0 的TE緩沖液來溶解，溶解后的質粒濃度約為100ng/μL。您也可以根據實驗需要來溶解質粒；

· 溶解后的質粒請于-20℃保存，并請避免反復凍融。

穿刺菌使用方法：

· 穿刺菌請在4℃保存，保存周期建議為1周，最長不超過1個月；

· 您可以根據質粒的抗性來進行擴大培養，請用牙簽、接種針或槍頭在菌絲位置挑取一小塊來擴大培養。