MSAP技術服務
產品概述:
甲基化敏感擴增多態性(methylation sensitive amplification polymorphism, MSAP)技術由Reyna-lópez 等報道,并被用于檢測雙相型真菌的DNA甲基化,它是在擴增片段長度多態性(amplified fragment length polymorphism, AFLP)技術的基礎上建立起來的。
技術流程:
提取高質量基因組DNA,分別用EcoRI/HpaII,EcoRI/MspI 兩組酶組合對基因組DNA 進行雙酶切,并連上相應的限制性內切酶的接頭,然后以接頭序列設計的預擴增引物,進行PCR 擴增。擴增產物稀釋后,再加入帶有選擇性堿基的引物,進行第二次PCR 擴增,擴增產物經毛細管電泳后,統計和分析DNA 條帶。
應用范圍:
技術優勢:
MSAP 技術相對其他測定DNA 甲基化程度的技術有如下優點:(1)不需知道被測DNA 的序列信息,在不同生物上具有通用性,可用于DNA 序列背景知識未知的生物。(2)操作相對簡便,在AFLP 技術體系的基礎無需改進,即可操作。(3)可在全基因組范圍檢測CCGG 位點的胞嘧啶甲基化變化。MSAP 技術的局限性在于不能完成非CCGG 位點的胞嘧啶甲基化。
可提供的服務
(1)基因組DNA提取、酶切、連接、預擴、選擴等
(2)按照您實驗的要求,為您設計優化實驗方案。包括:熒光標記的選擇,實驗條件摸索,內標的選用等等。
(3)合成熒光引物
送樣要求
(1)提供基因組DNA(DNA濃度不低于20ng/ul,純度純度(OD280/260)1.7-2.1,需冰袋運輸。
(2)需要本公司提取基因組,具體樣品類型要求可聯系實驗室。
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